Tecan-SPE固相萃取-质谱样本前处理技术
什么是SPE?
固相萃取（SPE）是一种样品前处理的方法，指在液体混合物中溶解或悬浮的化合物，根据其物理化学性质从混合物中分离出来的样品制备过程。
分析实验室使用固相萃取来浓缩和纯化样品进行分析。
固相萃取可用于从多种基质中分离出感兴趣的分析物，包括尿液、血液、水、饮料、土壤和动物组织等。
为什么要用SPE?
准确性与精密度
降低批间差
减少由于校准问题造成的重复运行
质量控制
减少可追溯性和过程安全性方面的问题
减少书面工作
运行费用
减少实验耗材
降低人工操作时间
周转时间
减少由于人工错误导致的重复实验
减少污染问题
常规的样品处理前技术：
SOLID PHASE EXTRACTION (spE) – MOST SELECTIVE TECHNIQUE 固相萃取—选择性优越的技术
SOLID LIQUID EXTRACTION (SLE) 固液萃取
LIQUID LIQUID EXTRACTION 液液萃取
PROTEIN CRASH / PRECIPITATION 蛋白沉淀
FITRATION 过滤
CENTIFUGATION 离心
SETTLING AND DECANTING 淘洗和沉淀
HOMOGENIZATION均质化
DILUTION (DILUTE AND SHOOT) – LEAST SELECTIVE 稀释—选择性较差
固相萃取的常规方法：
重力
价格便宜，速度慢，完全靠重力没法保证结果的一致性
真空抽滤
常用的方法（目前）
不支持高性能的柱子（微粒经填料）
不适用粘稠样本和粘性样品
流速不均一
离心
不常规，不适用于体积超过100微升的样品
正压
变得越来越普遍
流速方便控制且均一
提供更高的压力
更容易实现自动化
负压存在的问题：
• 压力极大1bar：柱子容易堵住，而且不适合粘度高的样本；
• 均一性差：四周的样品先流完，中间的样品不容易流完；
• 压力体系受空柱子影响大：空柱会破坏压力系统，造成压力极具下降，未流干的柱子更不容流干。
正压系统地优势：
• 压力大：极大压力80psi，相当于6bar；适用于粘稠样本，且不易堵柱子；
• 均一性好：96惰性气体出孔，对应96个柱孔，且压力相同；
• 限流阀把空柱影响降到极低：当系统感应到有空柱时，限流阀的限流作用极大；
• 三级流速控制：通过流量调节阀/细调压力阀及粗调压力阀来控制流速，准确/均匀且容易控制。
• 适用于96孔柱板或者散柱子
产品介绍：
Tecan是生产手动固相萃取装置原产厂家，市面上绝大多数进口品牌正压装置全是Tecan公司OEM产品。
Resolvex® M10 正压固相萃取仪介绍
• Resolvex M10是紧凑的正压处理台式系统，适用于手动固相萃取（SPE）样品制备
• 单个气体端口上的流量控制，可对每个孔实施压力控制，从而确保所有样品均一化处理
• 直观的高/低压流量控制使其可满足各种方法的需求：低压设置可精确控制流量，而高压设置可让吸附床更快干燥。
• 该系统所需培训极少，且易于在任何实验室工作流程中使用。
RESOLVEX A100
特点
• 使用简单：易于操作，直观的触摸屏控制，能够即时开展萃取工作。易于设置，可同时运行多个方法
• 正压控制精准：电子压力控制，可编辑的压力曲线，可优化流速、减少运行时间，提高重复性
• 自动加液：全自动液体分配，多达11种液体通道全自动加液配置，使用已验证的、业界领先的硬件保证精确的溶剂分配。
• 兼容性好：支持1，3，6ml萃取柱-48位独立柱模块
• 安全性好：配有光幕可进行安全保护
RESOLVEX A200正压自动萃取工作站
高达 6 bar正压
• 独特的压力曲线:活化、上样、清洗、洗脱
• 整体压力控制
• 柱床干燥
• 触摸屏
快速更换缓冲液
• 8通道加样头
• 11条溶剂管路
• 30s 快速更换缓冲液
• 常规五步SPE步骤，20min可以处理一个96孔柱板
• 分配精密度： 100uL CV≤5％，750uL CV≤3％
各种型号的区别：
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柱体积 |
M10 48 |
M10 96 |
A100 48 |
A200 |
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1 ml |
Y |
Y |
Y |
Y |
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3 ml |
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- |
Y |
- |
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6 ml |
Y |
- |
Y |
- |
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NBE |
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Y |
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高效均一的柱压 |
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Y |
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更方便，柱子不需加盖 |
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Y |
Y |
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易于使用，适用于粘稠样品 |
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降低交叉污染，萃取柱在加压过程中密封 |
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Y |
Y |
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更强大，内置氮吹/空气柱干燥功能 |
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手动操作 |
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自动操作 |
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Y |
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LiHA全自动整合 |
- |
- |
- |
Y |
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溶剂添加管路 |
- |
- |
1 |
8 |
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自动压力曲线控制 |
- |
- |
Y |
Y |
产品图片：
RESOLVEX M10
Manual instrument手动设备 48/96 well format
RESOLVEX A100
Stand alone Automation 独立自动化设备 48/96 well format
RESOLVEX A200
Stand alone Automation 独立自动化设备 96 well format
可结合液体工作站实现全自动化
自动化正压SPE优势：
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SPE正压 |
SPE传统 |
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Sorbents 填料 |
微粒径填料 (10 µm) |
大粒径 (30 to 70 µm) |
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单分散微粒 |
粒度变化大 |
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分析物相互作用区域大 |
溶剂通道流失 |
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快速均一 |
影响重现性 |
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Pressure 压力 |
高达6 bar正压 |
重力，真空抽滤，离心 |
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流速快 |
流速慢 |
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单孔压力控制 |
真空度损失 |
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难处理和粘稠样品 |
单孔堵塞 |
智慧耗材
微粒经柱更短的时间达到更完全的吸附，洗脱体积也会变小。
吸附剂类型
Material:
Silica based
C4, C8, C18
Polymer based
二乙烯苯聚苯乙烯
Vendor Proprietary Polymers供应商专有聚合物
Chemestry:
Lipophilic hydrophilic interaction 亲油亲水作用
Reverse phase, Balanced hydrophilic-lipophilic反相/亲水/亲油平衡 HLB
Mixed mode ion exchange 混合模式例子交换
Strong cation exchange SCX
Strong anion exchange SAX
Weak cation exchange WCX
Weak anion exchange WAX
Particle Size:
10mm to 60mm
萃取柱类型
CEREX萃取柱
• 聚丙烯外壳
• 固定环
• 分流片
• 梯度密度玻璃纤维垫
• 微粒径填料(10-20 um)
• 梯度密度玻璃纤维垫
• 分流片
NBE 窄孔萃取技术
• 极大效率的单分散粒径吸收剂
• 小号的吸附床
• 需要更少的洗脱体积
• 分离的玻璃纤维层设计保持了极大的过滤能力
• 空气间隙控制孵育工作流的流程
• 柱内溶液不易流出
结合以上特点，NBE比常规的固相萃取柱性能更优异
TE-FIL沉淀板取代传统离心式蛋白沉淀
TE-FIL 沉淀板可以高通量地将生物样品在孔内进行蛋白沉淀。该板具有优越的性能，在孔内处理样品可以减少液体转移操作，加快处理过程，同时对极少量的血浆样品能完全回收并获得干净的处理液。
特点：
• 独立包装，降低污染
• 96孔设计满足高通量样品分析
• 适合自动化
• 经济-节约时间、人力和溶剂
• 提供多种滤膜材质以满足不同的应用需求
传统蛋白沉淀PPT与蛋白沉淀板TE-FIL PPT比较
TE-SL固液萃取板：
核心优势
• 独立包装，降低污染
• 消除在液液萃取中常见的乳化现象
• 无需液相分离
• 操作简单方便
• 快速且可重复
• 适合自动化的96孔板格式和流动萃取可满足高通量要求
• 分离粘稠样品的理想材料
TE-SLE固液萃取板提供了一种便捷的吸附剂以简化液-液萃取。萃取板使用硅藻土材料，为大量的实验流程提供了自动化友好的解决方案，以提升实验通量和重复性。
SPE柱子的部分应用（公安/司法/医院/医学CRO/IVD）
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Product Name |
柱型号 |
Functionality 功能 |
Application应用 |
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WCX 675 |
NBE, 1mL, 3mL |
Polymeric WCX |
儿茶酚胺及其代谢物 |
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Trace-N 610 |
NBE, 1mL, 3mL |
C-18 反相 |
肾素三合一(rT3,T3,T4) |
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OFX633 OFXQ635OFQC637 |
NBE, 1mL, 3mL |
Polymeric Proprietary聚合物 |
Oral Fluid/Urine Toxicology Confirmation口服液/尿液毒理学 |
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EtG/S 642 |
1mL, 3mL |
Silica Proprietary二氧化硅 |
EtG/EtS葡萄糖醛酸乙酯（EtG）和硫酸乙酯（EtS）（酒驾） |
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HPSAX412 |
NBE, 1mL, 3mL, 6mL |
Polymeric SAX |
Immunosuppressant免疫抑制剂 |
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PSAX61 |
NBE, 1mL, 3mL, 6mL |
Polymeric SAX |
THC/THCA四氢大麻酚/四氢大麻酚酸 （毒品，毒驾） |
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Atlas 301 |
NBE, 1mL, 3mL, 6mL |
Balanced Lipophilicity Hydrophobicity平衡亲油疏水性 ，HLB |
维生素D /甾体类激素 |
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Maestro A 613 |
NBE, 1mL, 3mL |
Silica Proprietary |
Phospholipids Removal/VitD磷脂去除/vitd |
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Trace-N 610 |
NBE,1mL, 3mL |
C-18 |
VitD/Steroids类固醇 |
临床CRO
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项目 |
货号 |
描述 |
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脂质体药物 |
417-0101RCH |
COLUMN CEREX WWP2 1ML 10MG _1/EA |
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阿普唑仑 |
30163862 |
Column Cerex Atlas 30u 1ml 30mg_96/PK |
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拉贝洛尔 |
30163862 |
Column Cerex Atlas 30u 1ml 30mg_100/PK |
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苯巴比妥 |
30163862 |
Column Cerex Atlas 30u 1ml 30mg_101/PK |
蛋白质组学（科研/科研CRO/生物制药）
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项目 |
货号 |
描述 |
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多肽脱盐 |
417-0051R-NBE |
COLUMN NBE WWP2 1ML 5.0MG _96/PK |
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多肽脱盐 |
417-0101RCH |
COLUMN CEREX WWP2 1ML 10MG _1/EA |
|
多肽脱盐 |
30163871 |
Column Cerex Atlas 30u 1ml 10mg_96/PK |
