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Plate Reader III高通量动静态激光光散射仪

DLS产品
传统比色杯 VS 微孔板
蛋白质聚集体行为、制剂溶液稳定性、尺寸

动态光散射
粒子在溶液中的布朗运动,引起粒子散射光强度的波动。动态光散射根据粒子的散射光强度波动,测定其平移扩散系数,从而计算粒子尺寸和尺寸分布。
除了测定亚微米大分子和纳米颗粒尺寸(rh)的基本应用之外,DLS还可以分析:
稳定性(kD、A2、B22)
聚集行为(Tm、Tagg、Tonset)
样品溶液纯度、 浊度以及污染物
等温、 变温稳定性
分子量
粘度
构象
颗粒密度

DynaPro系列


无与伦比的DLS/SLS检测器
Plate Reader III具有突破性技术创新,使用标准96、384或1536位多孔板, 进行全自动高通量动态光散射和静态光散射同步测定。NanoStar动态光散射仪, 使用比色杯测样,小样品量低至1μL。

 

  DynaPro Plate Reader III  DynaPro NanoStar
简介  在标准多孔板上进行全自动DLS测定  基于比色杯的传统DLS测定
应用  高通量自动化动态光散射 对于珍贵样品,可以低样品量,高质量表征尺寸和重均分子量,同时也支持在线检测
测量及筛选
扫描时间  1.5 h可以完成384多孔板的扫描  N/A
流体力学半径  0.5 nm ~ 1 μm  0.2 nm ~ 2.5 μm
灵敏度(检测下限)  对于溶菌酶 0.125 mg/mL  对于溶菌酶 0.1 mg/mL
分子量范围  1000 g/mol - 106 g/mol  300 g/mol - 106 g/mol
小样品体积 4 μL (1536 多孔板) 1.25 μL (石英比色杯)
10 μL (384 多孔板) 4 μL (一次性比色杯)
60 μL (96多孔板)  
温度控制  4 ℃ ~ 85 ℃  -15 ℃ ~ +150 ℃

DLS 应用

 

96微孔板中识别蛋白质聚集体行为

 


DYNAMICS中的Spectral View功能支持对多孔板扫描结果进行可视化的颜色编辑,尽管这些多孔板可能包含数百个样品,这里不同的的颜色表示不同的聚集程度,有利于快速、直观地挑选出极佳配方。

 


蛋白去折叠

 

 

DLS尺寸分析表明,在Tm = 69.8℃时,溶菌酶热诱导变性。静态光散射的分子量测定可以区分去折叠(分子量无变化)和聚集(分子量增加)。溶菌酶在整个温度区间的分子量变化表明样品发生了去折叠而非聚集。

 

构象与稳定性

 


单克隆抗体和药物结合不同的linker,会对其稳定性产生重大影响。这里,ADC2表现出两个热转变温度,一个在60℃,与ADC1相似,另一个接近50℃。动态光散射显示了热诱导聚集的程度在ADC1中可忽略不计,但在ADC2中却快速且广泛。DLS尺寸分析表明,在Tm = 69.8℃时,溶菌酶热诱导变性。静态光散射的分子量测定可以区分去折叠(分子量无变化)和聚集(分子量增加)。溶菌酶在整个温度区间的分子量变化表明样品发生了去折叠而非聚集。

 

聚集行为倾向性预测

 


通过测定一系列浓度梯度的样品,得到蛋白之间的非特异性相互作用,这对于选择和优化生物治疗候选药物和制剂是非常重要的,例如IgG,静态光散射测定(A2) 和动态光散射测定(kD)都可用于表征蛋白之间的非特异性相互作用。