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SEC-MALS多角度激光光散射系统

SEC-MALS多角度激光光散射系统,适用于HPLC&UHPLC,表征绝对分子量、 尺寸、 构象多角度光散射技术,基于光散射首要定律,MALS可以直接测定溶液中大分子和纳米粒子的分子量和尺寸。
可表征的物质:
• 多肽和蛋白
• 蛋白偶联物/复合物
• 高分子和共聚物
• 纳米颗粒
• 类病毒颗粒
• 脂质体和外泌体

DAWN
多角度光散射检测器的重要成员
•18角度激光光散射仪(DAWN): 灵敏度高、检测范围广
•3角度激光光散射仪(miniDAWN ): 适合一定分子量范围的蛋白和高分子
•microDAWN: 为UHPLC设计

 

 

怀雅特的多角度光散射检测器可兼容任何的:
• GPC/HPLC/UHPLC/APC:安捷伦(Agilent)、沃特世(Waters)、岛津(Shimadzu)、热电(Thermo)等
• 蛋白纯化系统:GE (AKTA )、Bio-rad等

 

A1:D20A5A1:D20 DAWN  miniDAWN  microDAWN
简介  18角度光散射  3角度光散射  UHPLC/APC设计的
多角度光散射
应用  多肽、 蛋白、 聚合物; 病毒、 囊泡和纳米颗粒    
分子量测定范围  200 ~ 1×109 Da  蛋白(200 ~ 1×107 Da)  
聚合物(200 ~ 10×106 Da)
分子尺寸范围(MALS-rg)  10 ~ 500+ nm  10 ~ 50+ nm  10 ~ 50+ nm
分子尺寸范围(DLS-rh)  联用模式: 0.5 ~ 300 nm* 联用模式: 0.5 ~ 50 nm 联用模式: 0.5 ~ 30 nm
单机模式: 0.5 nm ~ 1μm 单机模式: 0.5 nm ~ 1 μm 单机模式: 0.5 nm ~ 1 μm
兼容性  HPLC  HPLC  UPHLC/APC
流通池  标准和高温流通池 标准流通池 微型流通池
内置COMET自清洗模块 内置COMET自清洗模块 
检测器  18角  3角  3角
MALS 灵敏度: 0.2 μg  0.5 μg  70 ng
水相缓冲液中的BSA 
MALS灵敏度: 10 ng  25 ng  3.5 ng
THF中100 KDa的PS 
温度控制 常温型 常温型  常温型
制冷/加热型: -15 ~ 150 ℃
超高温型: 20 ℃ ~ 210 ℃
选件 温度控制 WyattQELS 动态光散射;  WyattQELS 动态光散射
荧光过滤
WyattQELS 动态光散射


示差折光检测器    

示差折光检测技术是一种通用的浓度测定技术,不受样品中发色基团或荧光吸收基团的影响。
Optilab示差折光检测器主要用于:
• MALS分析中的分子量测定
• 特性粘度测定表征高分子构象和支化度
• 三检测器表征共聚物和蛋白偶联物
• 色谱峰的基本定量
• 测定样品的dn/dc
• 测定溶剂的绝对折射率

一款可与MALS检测器在相同波长下独立测定dn/dc的仪器,Optilab系列适用于不同的应用领域,并且可以测定溶剂绝对折射率。

  Optilab  Optilab HC  microOptilab
简介  适用于标准HPLC,拥有超 适用于CG-MALS蛋白纯化 适用于UHPLC,拥有超
高的灵敏度和动态范围 和其它的高浓度测定分析 高灵敏度和动态范围
应用  测定范围可低至20ng/mL  测定蛋白,浓度测定上限 UHPLC/APC
可达180mg/mL 
dRI测定范围 -0.0047 ~ +0.0047  -0.0026 ~ +0.034  -0.0047 ~ +0.0047
(折射率单位 RIU) 
动态范围  12,000,000 : 1  23,000,000 : 1  6,000,000 : 1
dRI灵敏度  0.75x10-9 RIU  1.5x10-9 RIU  1.5x10-9 RIU
aRI测定范围  1.2 ~ 1.8  1.2 ~ 1.8  1.2 ~ 1.8
aRI灵敏度  ±0.002  ±0.002  ±0.002
温度控制  4 ℃ ~ 65 ℃  4 ℃ ~ 65 ℃  4 ℃ ~ 65 ℃
控温技术  帕尔贴自动热调谐  帕尔贴自动热调谐
脉冲抑制  毛细管桥脉冲补偿元件  毛细管桥脉冲补偿元件
延迟柱规格  标准体积为16.2 mL 5.4 mL
可选体积为8.1, 5.4 或者 2.7 mL 

 

SEC-MALS 应用

聚集体和碎片

UHPLC能够分离聚集体和片段,与MALS结合,可准确识别IgG样品中的少量碎片,放大100倍的插图中显示尽管每个聚集峰占单体总质量的百分之一, 但它们仍可被μSEC-MALS准确分析和识别。

 

低分子量高分子和多肽


亚甲基二苯基4,4'-二异氰酸酯 (MDI) 分子量只有250 Da,在THF中极易形成低聚物, 对于表征极小分子量的MDI分子,超高灵敏度的HELEOS和TREOS是必不可少的重要工具。

 

聚集体和碎片蛋白偶联物和共聚高分子分析


ASTRA的蛋白偶联物分析方法使用MALS、UV和RI检测器的数据来表征蛋白偶联物和共聚物。该方法可以测定蛋白、修饰物和偶联物的分子量,以及偶联物的平均消光系数和dn/dc。

 

蛋白复合物和构象


尽管IL4 trap分子量较低, 但是它却早于复合物IL4 trap:IL4 被洗脱出来。MALS中的MW分析(红色符号)表明MW值符合预期、在线DLS 的rh数据(蓝色空心符号)解释了复合物IL4-trap:IL4 较晚洗脱的原因:IL4与IL4-tarp复合后构象发生了变化,复合物的结构更紧凑。